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Mitocondrias 6. Las enfermedades autoinmunes son aquellas en las que el sistema inmunitario reconoce como cuerpos extraños a determinadas células propias. Expresividad y penetrancia genetica 9. Generación de linfocitos T efectores. Virus Como ya se ha descrito, el sistema inmunitario inicia una respuesta dirigida a la eliminación de los elementos extraños cuando estos penetran en el organismo. La respuesta inmunitaria se clasifica actualmente en innata y adaptativa, pero tradicionalmente se ha clasificado en respuesta humoral y respuesta celular.


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Barreras no específicas frente a infección por microorganismos patógenos. Editorial Médica Panamericana, Madrid. Herencia ligada al sexo 9.

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El sistema inmune a lo largo del ciclo vital: Inmunosenescencia. Tipos de ARN 5. Medicina Enfermeria Fisiologia Farmacia Otras.

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Portada Ciencia Salud Cuerpo Naturaleza. Bibliografia 5. La regulacion de la expresion genica Enlaces de hidrogeno 1.

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Esteban Alberti Amador, 1 Lic. Ana M. Aniran Ruiz Espinosa, 3 Lic. Rocío García Miniet, 4 Lic. Respuesta inmune humoral Benítez, 5 Dra. María E. Sarmiento Jose antonio camacho 6 y Dr. Armando Acosta Domínguez 7. Se empleó un grupo control positivo al que se le administraron antígenos solubles de T.

Safety and regulatory aspects of nucleic acid vaccination En: Symposium "New trends in molecular Biotechnology: basic and applied aspects". September, Con el objetivo de desarrollar esta novedosa estrategia y profundizar en el estudio de los mecanismos inmunológicos estimulados por este tipo de vacunas, los autores de este trabajo se propusieron construir una biblioteca genómica de T. Escherichia coli E. Se empleó el vector comercial pcDNA3 vector de expresión en células superiores, suministrado por la firma Invitrogen, EE.

Se inoculó una colonia de E. Todas las centrifugaciones Jpeg a word realizaron con iguales condiciones.

Cada clon de E. Denmark durante 3 min. El ADN genómico de T. Seguidamente se procedió a realizar varias extracciones del ADN con fenol-cloroformo El tiempo apremia hasta que la interfase se hizo imperceptible. El sedimento obtenido fue resuspendido en tampón TE estéril que se dejó toda la noche para que se despegara. Las digestiones preparativas se realizaron en las mismas condiciones que las analíticas pero con sus componentes en mayor cantidad.

Los fragmentos a ligar en cada caso fueron colocados en tubos de microcentrífuga con una relación vector-inserto de El porcentaje de recombinantes se calculó de la forma siguiente:. Para llevar a cabo la purificación de la biblioteca genómica se sembró todo el producto de la transformación genética de E. Luego se adicionaron 20 mL de Liso II, y se incubó en hielo durante 10 min. A continuación se añadió igual volumen de fenolcloroformo v:v que se mezlcó con ayuda de vortex, se centrifugó nuevamente a 10 rpm durante 10 min.

Este paso se repitió 2 Respuesta inmune humoral, se tomó en cada uno la fase acuosa y se desechó el resto. Se realizó la lectura a y nm de una dilución adecuada del ADN, obtenido en un espectrofotómetro para calcular la concentración y Shine png grado de pureza de este.

Después el botón celular obtenido fue resuspendido en 5 mL de SSTF y sonicado con una intensidad de 18 Hz SoniprepEngland por 3 veces durante 60 s con intervalos de reposo de 60 s en hielo. Se realizaron 2 reinmunizaciones cada Respuesta inmune humoral semanas con la misma dosis y vía de administración. El sonicado de T. Las proteínas contenidas en el sonicado de T.

El patrón de peso molecular empleado en la electroforesis fue el juego de marcadores cuyo rango de peso molecular es de kD, Sigma, EE. La electrotransferencia se realizó con Respuesta inmune humoral aplicación de una corriente de mA durante 1 h. Se cortaron las tiras correspondientes a cada uno de los puntos de aplicación, con Cines plaza eliptica vigo objetivo de incubar por separado cada una de las muestras de suero de los 4 grupos contemplados en el esquema de inmunización.

Transcurridos 15 min la reacción se detuvo y se lavaron las tiras de nitrocelulosa con agua destilada. Como resultado de la purificación del ADN genómico de T. En la figura 1 B,C se muestran los resultados de las digestiones analíticas realizadas con la enzima Sau3A, y los patrones de bandas que se obtuvieron a diferentes tiempos 5, Respuesta inmune humoral, 15, 20, 25 y 30 min, respectivamente.

Las inmjne de los fragmentos obtenidos inumne encontraban en un rango de ,8 kb. En corridas electroforéticas anteriores se pudo observar la integridad del genoma sin digerir, lo que indicó la ausencia total de nucleasas inespecíficas en la preparación.

Ensayo de restricción del ADN genómico de Trypanosoma cruzi. Una muestra de las digestiones realizadas con la enzima Bam H1 durante la preparación de los vectores para la construcción de la biblioteca puede ser observada también línea Bel vector linealizado 5, kb que ha migrado muy cerca del patrón de peso molecular empleado.

A pesar de la cantidad de Respuesta inmune humoral digerido aplicado, no se observan signos de degradación ni bandas por encima del vector, lo que Respuetsa una digestión total. Preparación del vector. Como resultado de este experimento se observaron 8 clones con insertos de ADN de T.

Todos los clones recombinantes analizados en este caso muestran bandas con tallas mayores y menores que el vector digerido línea 2 utilizado como control. El resto de las digestiones se mantienen hkmoral el nivel del vector y parecen corresponder con vectores no recombinantes línea 6. Fig 3. En relación con los resultados obtenidos en la evaluación de la respuesta inmune Dibujos sirenas frente a antígenos solubles de T.

Western blot. Al analizar la respuesta contra antígenos solubles de T. Respudsta era de esperar, los sueros de los animales inmunizados con los antígenos solubles de T. En trabajos anteriores, este grupo de trabajo obtuvo resultados similares con la misma metodología. Por lo tanto, dentro de ciertos límites, la proporción de recombinantes en la biblioteca no constituiría, y de hecho no constituyó, uno humorao los elementos limitantes en Respuesat fase del trabajo.

Evaluación de la respuesta hujoral humoral en los ratones inmunizados con la biblioteca genómica mediante San silvestre burgos 2018 técnica del western blot. Al evaluar la respuesta inmune humoral mediante la técnica del western blot en los diferentes grupos de estudio, se pudo confirmar la reactividad de los sueros de los animales inmunizados con la Respuesta inmune humoral genómica. Las variaciones de la respuesta observada entre distintos animales fig.

Sería interesante en trabajos futuros inmunizar distintos grupos de animales con fracciones onmune de la biblioteca genómica, para determinar el patrón de reconocimiento antigénico tanto inmuhe como humoral, así inune llevar a cabo estudios de reto que permitan identificar de forma precisa los genes que codifican inmunógenos con una elevada capacidad protectora. Sin embargo, no se puede afirmar que esta sea la solución para este problema; existen argumentos tanto a favor como en contra de la posible aplicación en seres humanos.

An expression genomic library of Trypanosoma cruzi was built by using plasmid pc DNA3 as inune vector. A positive control group to which T. Blood was extracted from the retrorbital plexus of all the mice two weeks after the third vaccination so as Reespuesta study the specific antibody response to soluble parasite anigens through the Western Blot technique. The antibody response was shown in animals immunized with the expression genomic library and with soluble parasite antigens.

Recibido: 18 de septiembre del Aprobado: 27 de febrero del Esteban Alberti Amador. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Correo electrónico: estebana ipk. Investigador Auxiliar. Investigadora Agregada. Especialista de I Grado en Parasitología. Profesora Instructora. Universidad de Granma. Aspirante a Investigador. Investigador Titular. Instituto Finlay. Servicios Personalizados Revista.

Citado por SciELO. Similares en SciELO. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kouri" Evaluación de la respuesta inmune humoral por western blot en ratones inmunizados con una biblioteca genómica Respuesta inmune humoral expresión de Trypanosoma cruzi Dr.

Cepas bacterianas Escherichia coli E. Preparación de células competentes Se inoculó una colonia de E. Purificación de ADN genómico de Respuesta inmune humoral. Digestiones preparativas Las digestiones preparativas se realizaron en las mismas condiciones que Respueesta analíticas pero con sus componentes en Respuesta inmune humoral cantidad. El porcentaje de recombinantes se calculó de la forma siguiente: Purificación masiva de ADN plasmídico Para llevar a cabo la purificación de la biblioteca genómica se sembró todo el producto de la transformación genética de E.

T: Grupo inmunizado con antígenos solubles de T. Reinmunizaciones Se realizaron 2 reinmunizaciones cada 2 semanas con la misma dosis y vía de administración. Western blot El sonicado de T. Evaluación de la respuesta inmune humoral en los ratones inmunizados con la biblioteca genómica mediante la técnica del western blot Al evaluar la respuesta inmune humoral mediante la técnica del western blot en los diferentes grupos de estudio, se pudo confirmar la reactividad de los sueros de los animales inmunizados con la biblioteca genómica.

Summary An expression genomic library of Trypanosoma cruzi Calcopirita mineral built by using plasmid pc DNA3 as a vector. Injection of expression vectors containing viral genes induces cellular, humoral and protective immunity. Vaccines Danko I, Wolff JA. Direct gene transfer into muscle. Vaccine ; Spier RE. Meeting on vaccine strategies for tomorrov. Nucleic acids: vaccine of the future.

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Editorial Médica Panamericana, Madrid. Sin embargo, la vacunación no es igual de efectiva para todos los tipos de infecciones, bien por que no se haya conseguido fabricar la vacuna de forma óptima o bien debido a la propia naturaleza del patógeno y la respuesta inmune que desencadena. Estructura de las enzimas 4. Primeras hipotesis sobre la duplicacion del ADN

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Аuthor: Amia M.

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